Coupling live-cell imaging and isolation of the same single cell to profile the transient states of predicted drug-tolerant cells.
Benjamin Bian, Agnès Paquet, Marie-Jeanne Arguel, Mickael Meyer, Ludovic Peyre, Asma Chalabi, Marielle Péré, Kevin Lebrigand, Rainer Waldmann, Pascal Barbry, Paul Hofman, Jérémie Roux
Author Information
Benjamin Bian: Université Côte d'Azur, CNRS UMR 7284, Inserm U 1081, Institut de Recherche sur le Cancer et le Vieillissement de Nice, Centre Antoine Lacassagne, 06107 Nice, France.
Agnès Paquet: Université Côte d'Azur, CNRS UMR 7275, Institut de Pharmacologie Moléculaire et Cellulaire, 06560 Sophia Antipolis, France.
Marie-Jeanne Arguel: Université Côte d'Azur, CNRS UMR 7275, Institut de Pharmacologie Moléculaire et Cellulaire, 06560 Sophia Antipolis, France.
Mickael Meyer: Université Côte d'Azur, CNRS UMR 7284, Inserm U 1081, Institut de Recherche sur le Cancer et le Vieillissement de Nice, Centre Antoine Lacassagne, 06107 Nice, France.
Ludovic Peyre: Université Côte d'Azur, CNRS UMR 7284, Inserm U 1081, Institut de Recherche sur le Cancer et le Vieillissement de Nice, Centre Antoine Lacassagne, 06107 Nice, France.
Asma Chalabi: Université Côte d'Azur, CNRS UMR 7284, Inserm U 1081, Institut de Recherche sur le Cancer et le Vieillissement de Nice, Centre Antoine Lacassagne, 06107 Nice, France.
Kevin Lebrigand: Université Côte d'Azur, CNRS UMR 7275, Institut de Pharmacologie Moléculaire et Cellulaire, 06560 Sophia Antipolis, France.
Rainer Waldmann: Université Côte d'Azur, CNRS UMR 7275, Institut de Pharmacologie Moléculaire et Cellulaire, 06560 Sophia Antipolis, France.
Pascal Barbry: Université Côte d'Azur, CNRS UMR 7275, Institut de Pharmacologie Moléculaire et Cellulaire, 06560 Sophia Antipolis, France; Université Côte d'Azur, FHU OncoAge, 06107 Nice, France.
Paul Hofman: Université Côte d'Azur, CNRS UMR 7284, Inserm U 1081, Institut de Recherche sur le Cancer et le Vieillissement de Nice, Centre Antoine Lacassagne, 06107 Nice, France; Université Côte d'Azur, FHU OncoAge, 06107 Nice, France.
Jérémie Roux: Université Côte d'Azur, CNRS UMR 7284, Inserm U 1081, Institut de Recherche sur le Cancer et le Vieillissement de Nice, Centre Antoine Lacassagne, 06107 Nice, France; Université Côte d'Azur, Inria, INRAE, CNRS, Sorbonne Université, Biocore Team, 06902 Sophia Antipolis, France. Electronic address: jeremie.roux@univ-cotedazur.fr.
Cell response variability is a starting point in cancer drug resistance that has been difficult to analyze because the tolerant cell states are short lived. Here, we present fate-seq, an approach to isolate single cells in their transient states of drug sensitivity or tolerance before profiling. The drug response is predicted in live cells, which are laser-captured by microdissection before any drug-induced change can alter their states. This framework enables the identification of the cell-state signatures causing differential cell decisions upon treatment. For complete details on the use and execution of this protocol, please refer to Meyer et al. (2020).