高通量、高分辨率的原位结构解析 目前蛋白质原位结构的解析主要依赖Cryo-ET,然而,这种方法需要收集每个区域的倾转序列,使原位样品的数据收集效率严重降低,因此原位课题通常难以开展。 为了实现高通量、高分辨率的原位结构解析,课题组开发了新型原位结构解析方法-isSPA,在这个方法里,我们将非目标蛋白的密度视为非高斯噪声,在单张高剂量的电镜图像中直接探测目标蛋白,我们推导了最优蛋白质探测函数,极大地提高了在图像中识别目标蛋白的效率。此外,我们还开发了一个排序函数,能有效地消除模型偏差对分辨率的影响。由于不需要收集倾转序列,isSPA较断层方法的数据收集通量提高了至少30倍。 课题组与北京理工大学张法、万晓华课题组合作,对isSPA方法进行了GPU加速-GisSPA,GPU加速将计算效率提高了300-500倍。目前,课题组应用GisSPA已经解析了红藻细胞切片中的藻胆体和光系统II的结构(分辨率分别达到了3.4和3.9埃)和酵母细胞切片中的核糖体结构(分辨率为2.9埃)。

Introduction

目前蛋白质原位结构的解析主要依赖Cryo-ET,然而,这种方法需要收集每个区域的倾转序列,使原位样品的数据收集效率严重降低,因此原位课题通常难以开展。

为了实现高通量、高分辨率的原位结构解析,课题组开发了新型原位结构解析方法-isSPA,在这个方法里,我们将非目标蛋白的密度视为非高斯噪声,在单张高剂量的电镜图像中直接探测目标蛋白,我们推导了最优蛋白质探测函数,极大地提高了在图像中识别目标蛋白的效率。此外,我们还开发了一个排序函数,能有效地消除模型偏差对分辨率的影响。由于不需要收集倾转序列,isSPA较断层方法的数据收集通量提高了至少30倍。

课题组与北京理工大学张法、万晓华课题组合作,对isSPA方法进行了GPU加速-GisSPA,GPU加速将计算效率提高了300-500倍。目前,课题组应用GisSPA已经解析了红藻细胞切片中的藻胆体和光系统II的结构(分辨率分别达到了3.4和3.9埃)和酵母细胞切片中的核糖体结构(分辨率为2.9埃)。

若使用GisSPA,请引用以下论文:

https://doi.org/10.52601/bpr.2021.210001

https://doi.org/10.1016/j.xinn.2021.100166

https://doi.org/10.1038/s41467-023-36175-y

Publications

  1. Optimizing weighting functions for cryo-electron microscopy
    Cheng Jing, Zhang Xinzheng, 2021.02 - Biophysics Reports
  2. Determining structures in a native environment using single-particle cryoelectron microscopy images
    Cheng Jing, Li Bufan, Si Long, Xinzheng Zhang, 2021.11 - The innovation
  3. Determining protein structures in cellular lamella at pseudo-atomic resolution by GisSPA
    Cheng Jiing, Liiu Tong,You Xin,Zhang Fa, Sui Sen-fang, Wan Xiaohua,Zhang Xinzheng, - Nature Communications

Credits

  1. Chengjing Chengjing16@mails.ucas.ac.cn
    Developer

    National Laboratory of Biomacromolecules, Institute of Biophysics, Chinese Academy of Sciences, China

  2. Xinzheng Zhang xzzhang@ibp.ac.cn
    Developer

    National Laboratory of Biomacromolecules, Institute of Biophysics, Chinese Academy of Sciences, China

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Tool TypeApplication
CategoryProtein structures
PlatformsLinux/Unix
TechnologiesC++, Python2
User InterfaceTerminal Command Line
Latest Releasev2.0 (March 21, 2023)
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