高通量、高分辨率的原位结构解析 目前蛋白质原位结构的解析主要依赖Cryo-ET,然而,这种方法需要收集每个区域的倾转序列,使原位样品的数据收集效率严重降低,因此原位课题通常难以开展。 为了实现高通量、高分辨率的原位结构解析,课题组开发了新型原位结构解析方法-isSPA,在这个方法里,我们将非目标蛋白的密度视为非高斯噪声,在单张高剂量的电镜图像中直接探测目标蛋白,我们推导了最优蛋白质探测函数,极大地提高了在图像中识别目标蛋白的效率。此外,我们还开发了一个排序函数,能有效地消除模型偏差对分辨率的影响。由于不需要收集倾转序列,isSPA较断层方法的数据收集通量提高了至少30倍。 课题组与北京理工大学张法、万晓华课题组合作,对isSPA方法进行了GPU加速-GisSPA,GPU加速将计算效率提高了300-500倍。目前,课题组应用GisSPA已经解析了红藻细胞切片中的藻胆体和光系统II的结构(分辨率分别达到了3.4和3.9埃)和酵母细胞切片中的核糖体结构(分辨率为2.9埃)。
Introduction
目前蛋白质原位结构的解析主要依赖Cryo-ET,然而,这种方法需要收集每个区域的倾转序列,使原位样品的数据收集效率严重降低,因此原位课题通常难以开展。
为了实现高通量、高分辨率的原位结构解析,课题组开发了新型原位结构解析方法-isSPA,在这个方法里,我们将非目标蛋白的密度视为非高斯噪声,在单张高剂量的电镜图像中直接探测目标蛋白,我们推导了最优蛋白质探测函数,极大地提高了在图像中识别目标蛋白的效率。此外,我们还开发了一个排序函数,能有效地消除模型偏差对分辨率的影响。由于不需要收集倾转序列,isSPA较断层方法的数据收集通量提高了至少30倍。
课题组与北京理工大学张法、万晓华课题组合作,对isSPA方法进行了GPU加速-GisSPA,GPU加速将计算效率提高了300-500倍。目前,课题组应用GisSPA已经解析了红藻细胞切片中的藻胆体和光系统II的结构(分辨率分别达到了3.4和3.9埃)和酵母细胞切片中的核糖体结构(分辨率为2.9埃)。
若使用GisSPA,请引用以下论文:
https://doi.org/10.52601/bpr.2021.210001
Publications
Optimizing weighting functions for cryo-electron microscopy
Determining structures in a native environment using single-particle cryoelectron microscopy images
Determining protein structures in cellular lamella at pseudo-atomic resolution by GisSPA
Credits
- Chengjing Chengjing16@mails.ucas.ac.cn Developer
National Laboratory of Biomacromolecules, Institute of Biophysics, Chinese Academy of Sciences, China
- Xinzheng Zhang xzzhang@ibp.ac.cn Developer
National Laboratory of Biomacromolecules, Institute of Biophysics, Chinese Academy of Sciences, China
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Summary
Accession | BT007343 |
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Tool Type | Application |
Category | Protein structures |
Platforms | Linux/Unix |
Technologies | C++, Python2 |
User Interface | Terminal Command Line |
Latest Release | v2.0 (March 21, 2023) |
Download Count | 183 |
Submitted By | Lingfei Kong |
Fundings
XDB37040101